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                  制備液相色譜時(shí),配制流動(dòng)相的用水要求

                  更新時(shí)間:2022-03-23瀏覽:2195次

                    制備液相色譜是色譜法的一個(gè)重要分支,以液體為流動(dòng)相,采用高壓輸液系統(tǒng),將具有不同極性的單一溶劑或不同比例的混合溶劑、緩沖液等流動(dòng)相泵入裝有固定相的色譜柱,在柱內(nèi)各成分被分離后,進(jìn)入檢測(cè)器進(jìn)行檢測(cè),從而實(shí)現(xiàn)對(duì)試樣的分析。該方法已成為化學(xué)、醫(yī)學(xué)、工業(yè)、農(nóng)學(xué)、商檢和法檢等學(xué)科領(lǐng)域中重要的分離分析技術(shù)應(yīng)用。
                   
                    一般柱長(zhǎng)在2—250mm,柱越長(zhǎng),分離度越高,但柱壓更高,分離所需時(shí)間更長(zhǎng);但分離度與理論塔板數(shù)的平方根成正比,所以一昧增加柱長(zhǎng)并不是zui有效的分離手段,一般情況下,150mm、5um的填料可以提供足夠的塔板數(shù)。
                   
                    正相色譜n流動(dòng)相極性小于固定相極性的分配色譜法稱為正相分配色譜。常用的分析柱有:n氨基柱、氰基柱、硅膠柱。n常用流動(dòng)相為極性小的有機(jī)溶劑。反相色譜n流動(dòng)相極性大于固定相極性的分配色譜法稱為反相分配色譜法。常用的分析柱有:ODS(C18),C8,C2。n常用流動(dòng)相為甲醇-水,乙腈-水。
                   
                    空間排斥色譜n也稱凝膠色譜,依據(jù)被分離組分分子尺寸與凝膠空徑大小之間的相對(duì)關(guān)系而分離,類似于分子篩作用。在一定分子線團(tuán)尺寸內(nèi),分子越大,保留時(shí)間越短。凝膠滲透——以有機(jī)溶劑為流動(dòng)相凝膠過濾——以水溶液為流動(dòng)相對(duì)于相同化學(xué)組成的高分子化合物,其分子尺寸大小與分子量成正比,因此凝膠色譜可以研究高分子化合物的分子量分布。
                   
                    制備液相色譜時(shí),配制流動(dòng)相應(yīng)用新鮮水,水質(zhì)要求越高放置時(shí)間越短。理想的HPLC用水應(yīng)為0.055μS/cm的超純水,并通過0.22μm的濾膜,除去熱源、有機(jī)物、無機(jī)離子及空氣等。

                   

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